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實驗服務(wù)

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TUNEL染色

服務(wù)介紹:

細胞凋亡期間基因組DNA被剪切后可能會形成低分子量的雙鏈DNA片段或者高分子量的單鏈DNA片段,這些受損的DNA片段斷端可通過酶反應(yīng)修飾核苷酸末端3’-OH被識別。TUNEL反應(yīng)可將凋亡與壞死及藥物和輻射誘導的DNA鏈斷裂區(qū)分開來。
實驗結(jié)果展示:
小鼠腫瘤

實驗過程:

  1.  經(jīng)過固定及透膜后的細胞用微球菌核酸酶(micrococcal nuclease)或重組DNA酶(Dnaseirecombinant)在15-25℃條件下孵育10 min后再加入TUNEL反應(yīng)液。
  2. TUNEL反應(yīng)液孵育:樣品中加入50 μl新鮮配置的TUNEL反應(yīng)液后在37℃潮濕環(huán)境中避光孵育60 min,孵育完畢后吸干凈TUNEL反應(yīng)液棄之,加入PBS輕柔沖洗3次;
  3. 4,6-二脒基--苯基吲哚(DAPI)染色:加入配置好的DAPI染液于室溫下孵育10 min吸出。PBS沖洗3次后,加入沒過細胞的PBS保濕;
  4. 觀察和分析:光學顯微鏡下觀察。


樣本運輸要求:

石蠟切片常溫、冰凍切片-20℃、固定后細胞爬片4℃
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