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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

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過表達(dá)細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù)

服務(wù)介紹:

過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系是將靶DNA克隆到具有某種抗性或選擇基因的載體上,載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主基因組中,使外源基因在宿主細(xì)胞中長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:

實(shí)驗(yàn)流程:

1. 引物設(shè)計(jì)與目的片段的擴(kuò)增

2. 目的片段與慢病毒載體質(zhì)粒連接,連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,挑取單克隆菌落,提取進(jìn)行檢測(cè)目標(biāo)基因。

3. 慢病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)48小時(shí)后,收集細(xì)胞上清,測(cè)定病毒滴度。

4. 抗生素篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。

5. qPCR或WB檢測(cè)目的基因的表達(dá)


 
 

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